對于樣品的稀釋問題要注意：

　　1.檢樣稀釋時，無菌稱取(或量取)有代表性的樣品25g(或ml)剪碎放于含有225ml滅菌稀釋液的玻璃瓶內，經充分振搖作成1:10的稀釋液。制備10倍系列稀釋的樣品勻液時，每一步都應該搖勻試管或反復吹吸，使菌體能夠盡量分散均勻。如系肉、魚等固體樣品，剪細于滅菌乳缽內與稀釋液研勻，或與稀釋液同置于滅菌均質器杯中，以8000-10000rpm速度攪拌1分鐘，使做成均勻的1：10稀釋液。對于像食醋或酸性飲料等酸度較高的樣品，如果直接用原樣液來檢測菌落總數，結果會偏低甚至為0，只有嚴格按標準要求先用滅菌的20-30%碳酸鈉溶液將其PH值調至中性后方可準確檢測出菌落總數。

　　2.根據食品衛生標準要求或對標本污染情況的估計，將上述1：10的檢樣稀釋液再做成幾個適當的10倍遞增稀釋液。即取1：10稀釋液1ml與9ml稀釋液混和做成1：100的稀釋液，然后依次遞增稀釋，做成1：1 000、1：10000等稀釋液。注意每遞增稀釋一次，必須另換1支1ml滅菌吸管，這樣所得檢樣的稀釋倍數方為準確。

　　3.從吸管筒內取出滅菌吸管時，不要將吸管尖部碰著其他仍留在容器內的吸管的外露部分；而且吸管在進出裝有稀釋液的玻璃瓶和試管時，也不要觸及瓶口及試管口的外側部分；因為這些部分都可能接觸過手或其他沾污物。

　　4.在作10倍遞增稀釋中，吸管插入檢樣稀釋液內不能低于液面2.5cm；吸入液體時，應先高于吸管刻度，然后提起吸管尖部離開液面，將尖部貼于玻璃瓶或試管的內壁使吸。管內液體調至所要求的刻度，這樣取樣較準確，而且在吸管從稀釋液內取出時不會有多余的液體粘附于管外。

　　5.當用吸管將檢樣稀釋液加至另一裝有9mL空白稀釋液的試管內時，應小心沿管壁加入，不要觸及管內稀釋液，以防吸管尖部外側部分粘附的檢液也混入其中。